ИФА – иммуноферментный анализ

Иммуноферментным анализом (ИФА) называют лабораторные исследования, базирующиеся на специфичности и высокой степени избирательности иммунологической реакции "антиген-антитело". Принято различать несколько десятков вариаций ИФА. Наибольшей популярностью пользуется гетерогенный твердофазный иммунный анализ или ELISA (enzyme linked immunosorbent assay).

Рис. 1 Иммуноферментный твердофазный анализ

Иммуноферментный анализ используется в двух целях: при необходимости определить наличие антигенов возбудителя какой-либо инфекции, либо (что практикуется гораздо чаще) для установления присутствия антител класса IgA, IgM, IgG к антигену возбудителя болезни. Посредством ИФА определяют антитела практически к любой половой инфекции.

Принцип иммуноферментного анализа базируется на иммунной реакции антигена с антителами, когда, присоединяя к антителам ферментную метку, исследователь определяет результаты реакции антитело-антиген, фиксируя появление, либо изменение уровня ферментативной активности.

Первая реакция наблюдается между очищенным антигеном возбудителей (Ag) и устанавливаемым Ig (Ab) путем фиксирования к плоскости лунок планшета иммунолога.

Вторая иммунологическая реакция проводится с целью выявления появившихся иммунных комплексов. В роли антигена здесь используют специфический связавшийся Ig, антителами же к нему применяют коньюгат – Ig (Ab) к определенному Ig человека, который метят ферментом К (пероксидазой). Происходящую за этим ферментативную реакцию катализирует ферментная часть молекулы коньюгата. В качестве субстрата реакции применяют не имеющее цвета вещество под названием хромоген, в процессе реакции хромоген приобретает окраску. По интенсивности окрашивания лунки определяют количество находящегося в пробе иммуноглобулина.

По завершению реакции проводится фотометрирование лунки, учет результатов ведут при помощи специального прибора. Математическая обработка результатов исследования показывает наличие и количество характерных антител в пробе.

Для серодиагностики используют 96-луночный полистирольный планшет, на боковых поверхностях ячеек которого заблаговременно адсорбируют антиген. При внесении исследуемой сыворотки в ячейки планшета к антигену прикрепляются гомологичные ему антитела. Затем в ячейки помещают меченные ферментом антитела против антител (иммуноглобулинов) человека. В случае, если исследуемая сыворотка содержит определяемые антитела - они проявятся как антигены, в реакцию с которыми вступят меченые антитела. Добавленный после промывки хромоген (краситель) позволит зафиксировать реакцию по характерному окрашиванию ячеек. Интенсивность такой окраски будет пропорциональна доле фермента, и, соответственно – количеству антител.

Измеряя оптическую плотность (ОП) находящейся в ячейке жидкости и сравнивая ее с шаблонным образцом, подсчитывают концентрацию антител на единицу объема. Чаще всего результат подсчитывают в единицах ОП. Характерно, что каждая тест-система снабжена собственными показателями патологии и нормы, а также показателями учета результатов, которые и следует принимать во внимание, интерпретируя результаты.

Современная венерология применяет методику иммуноферментного анализа, диагностируя сифилис, вирусные гепатиты, ВИЧ-инфекции. Также ИФА применяют для диагностики цитомегаловирусной и хламидийной инфекций, инфекций герпетического происхождения. Используя иммуноферментный анализ, определяют антитела при всевозможных инфекционных заболеваниях, уровень гормонов, маркеров онкологического характера, аутоантител.

Известно, что определение присутствия и уровня в крови антител при первичной диагностике половых инфекций не рекомендуется. В этом случае обращение к методике иммуноферментного анализа будет вполне оправданным. ИФА вполне способен распознать сифилис. Следует лишь помнить, что наличие в сыворотке антител свидетельствует исключительно о контактах организма с возбудителями в прошлом, либо в настоящее время.

Задать вопрос, написать отзыв

Валерия 2018-08-22 16:01:18

Мрп слабоположительный, при этом 8 месяцев назад было проведено лечение сифилиса. Почему может быть такой показатель?

Меньщикова Галина Владимировна Врач дерматовенеролог, дерматоонколог. Кандидат медицинских наук. Врач первой категории. Стаж более 15 лет отвечает:

Обратитесь к сифилидологу. Анализы для контроля излеченности сифилиса делаются в комплексе (РПГА, иммуноблот). А "следы" этого диагноза могут присутствовать в анализах много лет.

саня 2018-08-19 13:02:00

ифа 1-40 положительный а референсный отрицццательный раньше болел и пролечился что это значит?

Меньщикова Галина Владимировна Врач дерматовенеролог, дерматоонколог. Кандидат медицинских наук. Врач первой категории. Стаж более 15 лет отвечает:

ИФА на какую инфекцию? Уточните.

Ирина 2018-07-25 12:39:58

Добрый день! В 2002 году переболели с мужем первичным сифилисом . В данное время я беременна. Мы сдали анализы:РМП отрицательно, IgM отрицательно IgG отрицательно, ифа ссумарн положительно, РПГА 4+. Врач говорит что нужно профилактическое лечение в КВД на 20 неделе 6 уколов в день 10 дней. Скажите, пожалуйста, есть ли у меня показания для такого серьезного лечения.

Багаева Мадина Врач дерматовенеролог, член Московского общества дерматовенерологов и косметологов им. А. И. Поспелова отвечает:

Это очень тонкий момент, т.к во время беременности возможны ложноположительные анализы. Необходима консультация сифилидолога.

Анастасия 2018-07-05 09:18:53

11 лет назад переболела сифилиз. RWотр.ИФА иногда положительно.но не всегда.пройду ли я мёд.комиссию по сан.книжки?

Багаева Мадина Врач дерматовенеролог, член Московского общества дерматовенерологов и косметологов им. А. И. Поспелова отвечает:

Требования так часто меняются, что боюсь не смогу ответить вам точно на этот вопрос.